Pretreatment with water kefir reduces the development of acidified ethanol-induced gastric ulcers

Abstract To evaluate the gastroprotective and antioxidant effects of pretreatment with water kefir on ulcers induced with HCl/ethanol. All pretreatments lasted 14 days. Male mice were separated into five groups: the control (C) group received vehicle without ulcer induction; the ulcerated (U) group received vehicle; the lansoprazole (L) group received 30 mg/kg/day lansoprazole; the water kefir (WK15 and WK30) groups received WK at a dose of 0.15 or 0.30 ml/kg/day, respectively. Gastroprotection was measured by ulcer area, ulcer index and ulcer reduction percentage. Antioxidant effects were quantified by measuring advanced oxidized protein products (AOPPs), superoxide dismutase (SOD), and catalase activity in the stomach. Pretreatment with WK at both doses promoted gastroprotection against HCl/ethanol-induced ulcers much like the pretreatment with lansoprazole. In addition, WK decreased protein oxidation while increasing SOD and catalase activity. We concluded that pretreatment with water kefir increases the activity of antioxidant enzymes, preventing gastric lesions induced by HCl/ethanol by maintaining the antioxidant performance in gastric tissue.

Selective Cytotoxic effect of Probiotic, Paraprobiotic and Postbiotics of L. casei strains against Colorectal Cancer Cells: Invitro studies

Abstract This study highlights the cytotoxic effect of three L. casei strains on colorectal cell lines in invitro conditions. Different concentrations of live, heat killed (HK) and cell free supernatant (CFS) of three L.casei strains were subjected to CaCo2 and MRC5 cell lines. The viability of the treated and untreated cells was determined after 72 hrs by MTT assay, and IC50 estimated. Apoptosis was evaluated by Annexin V-propidium iodide method using flow cytometry. The live, HK and CFS of the L. casei strains showed cytotoxic effects on colorectal cell lines with significant differences. The cytotoxicity effects of live cells on CaCo2 cells were significantly higher (p˂0.01) than the HK cells. A dose dependent response was observed, as higher concentrations resulted in enhanced cytotoxicity effects. Live L.casei 1296-2cells inhibited 91% of CaCo2 cell growth, with IC50 of less than 108 cfu/ml. MRS medium and concentrations of CFS at above 20% v/v, were cytotoxic to the normal cell lines. Flow cytometry analyses of L. casei 1296-2 indicated that cytotoxicity effects on CaCo2 cells is related to apoptotic induction. Invitro studies indicate that Live and CFS of L. casei 1296-2 might be promising candidate for the control of colorectal cancers

Facilitating the gut brain axis by probiotic bacteria to modulate neuroimmune response on lead exposed zebra fish models

Unravelling the efficacy of gut biome has a major impact on health. An unbalanced microbiome composition is linked to many common illnesses such as gut dysbiosis, mental deformities and immunological imbalance. An optimistic influence on the gut biome can be made by consumingprobiotics. This would stimulate neuroprotection and immunomodulation intended by heavy metals pollution. Lead is a major source of neurotoxin that can induce neural deformities. Lactobacillusspecies isolated from curd were characterized to confirm its specificity. Zebra fish was reared at standard conditions and preclinical assessment on the intensity of induced neurotoxin lead was performed. The embryo toxic assay, immunomodulation effects and animal behavioural models endorsed the consequence of neurotoxicity. Different concentrations of bacterial isolate with standard antidepressant was considered for analysing the vigour of toxicity and its influence on cognitive behaviour by novel tank diving method. The restrain in the animal behaviour was also conferred by all the test samples with a decreased bottom dwelling time which was authenticated with haematology and histopathological studies. The alterations in morphology of the lymphocytes were balanced by the treated test samples. This study paves a twofold potential of probiotic as neuroprotectant and immune modulator against heavy metal toxicity.

Estudo da relação entre atividade antioxidante e contagem de bactérias láticas em iogurtes de frutas e leites fermentados comercializados em Santos-SP / Study of the relationship between antioxidant activity and bacterial count in fruit yoghurts and fermented milks available in Santos-SP

Os benefícios de probióticos e o potencial antioxidante dos alimentos estão amplamente descritos em literatura. O objetivo deste trabalho foi quantificar as bactérias lácticas presentes em produtos lácteos e analisar a atividade antioxidante desses produtos na busca por relação estatística entre esses parâmetros. Foram adquiridos produtos com alegações funcionais no rótulo e os mesmos foram submetidos à contagem de bactérias lácticas e a uma extração da atividade antioxidante, além de aferição do pH. Dentre os produtos avaliados, três deles apresentaram contagem de bactérias lácticas abaixo do esperado pela legislação vigente. Não foi possível detectar influência de variáveis na composição frente à ação antioxidante dos alimentos analisados e também não foi possível fazer associação entre a quantidade de bactérias lácticas e os valores de atividade antioxidante.

Quantificação de bactérias lácticas em produtos lácteos com potencial probiótico comercializados nos supermercados de Volta Redonda e Barra Mansa / Quantification of lactic bacteria with potential probiotic dairy products sold in supermarket of Volta Redonda and Barra Mansa

No setor lácteo, os alimentos funcionais que são benéficos à saúde atingiram um bom mercado consumidor. Um produto para ser considerado probiótico deve apresentar contagem de microrganismos maior ou igual a 1x107 células viáveis/g ou mL do produto. O objetivo do trabalho foi avaliar a contagem de bactérias lácticas viáveis em produtos comerciais que declaram a presença de microrganismos nos rótulos. Foram analisadas 24 amostras de 5 diferentes marcas de iogurtes e leites fermentados comercializadas em supermercados de Volta Redonda/RJ e de Barra Mansa/RJ. Foram realizadas a avaliação microbiológica de viabilidade das bactérias lácticas, a análise de pH e a acidez titulável. Todas as marcas avaliadas apresentaram contagens superiores a 107 UFC/mL de bactérias láticas. Os valores de pH e acidez titulável atendem os critérios legais.

Identifying probiotic characteristics of Lactobacillus crispatus isolated from the vagina

Lactobacilli prevent overproduction of pathogenic microorganisms and contribute protecting vaginal microbiota. Many probiotic microorganisms are categorized as Lactic Acid Bacteria. In this study, it was aimed identifying probiotic characteristics of Lactobacillus crispatus isolated from the vagina of a healthy woman. For this purpose, lactic acid, hydrogen peroxide and proteolytic activity quantities and auto-aggregation, co-aggregation and hydrophobicity abilities of Lactobacillus crispatus, which has been isolated and identified by 16s rRNA sequence analysis, were determined. Additionally, bile salt and acid resistance, along with antibiotic susceptibility of Lactobacillus crispatus were analyzed by the end of 3 hours. Lactic acid, hydrogen peroxide and proteolytic activity quantities of Lactobacillus crispatus were measured 2.275%, 0.334±0.075 µg/mL and 2.131±0,000 mg/mL respectively. The findings include existence of co-aggregation and auto-aggregation ability, but not hydrophobicity. By the end of 3 hours, the viability was preserved in 0.1% and 0.3% bile salt medium and, at pH 3. L. crispatus exhibited resistance to methicillin, metronidazole, oxacillin, and sulfamethoxazole + trimethoprim, but the bacteria exhibited susceptibility to tested the other antibiotics. This study will make an important contribution to the literature about probiotic characteristics of L. crispatus and our strain isolated from the vagina might be considered as a candidate probiotic.

Desenvolvimento tecnológico do Bacillus coagulans BVB5 como potencial cepa probiótica / Technological development of Bacillus coagulans BVB5 as potential probiotic strains

Introdução: O aumento da demanda por alimentos funcionais, os quais incluem os suplementados ou fermentados por microrganismos probióticos, resultou no avanço da pesquisa e desenvolvimento de novas cepas potencialmente probióticas. Os microrganismos probióticos pertencentes ao gênero Bacillus spp. são atraentes devido a sua estabilidade inerente de bactérias formadoras de esporos. Os esporos permitem uma vida de prateleira prolongada e aumentam a capacidade do microrganismo de sobreviver às barreiras gástricas, que se revelam uma vantagem sobre os lactobacilos. Objetivo: Foram realizados experimentos para o desenvolvimento tecnológico de duas cepas formadoras de esporos de Bacillus coagulans BVB1 e BVB5 como potenciais microrganismos probióticos objetivando avaliar o potencial probiótico dos mesmos. Método: Como primeira etapa, as caracterizações fenotípica e genotípica identificaram que a cepa BVB1 não era B. coagulans e sim B. subtilis. Os estudos seguiram com a cinética da fermentação/esporulação apenas da cepa de Bacillus coagulans BVB5. Conclusão: O desafio da esporulação de Bacillus coagulans BVB5 foi vencido, fato que pode ser verificado na cinética da fermentação que apresentou resultados superiores a 99% de grau de esporulação

Introduction: The increased demand for functional foods, which include those supplemented or fermented by probiotic microorganisms, resulted in the advancement of research and development of new potentially probiotic strains. Probiotic microorganisms Bacillus spp. Are attractive because of their inherent stability of spore forming bacteria. Spores allow prolonged shelf life and increase the ability to survive gastric barriers, which prove to be an advantage over lactobacilli. Objective: Experiments were performed for the technological development of Bacillus coagulans BVB1 and BVB5 as potential probiotic microorganisms with two strains of Bacillus coagulans aiming to evaluate the efficacy of probiotic product composed of spore forming microorganism (Bacillus coagulans strains BVB1 and BVB5). Method: As a first step, phenotypic and genotypic characterization identified that the BVB1 strain was not B. coagulans but B. subtilis. Although Bacillus subtilis strain BVB1 presented a technological potential to be used as a probiotic strain in food additives, the studies followed with the kinetics of fermentation/sporulation of Bacillus coagulans BVB5, in agreement with the master's project originally proposed. Conclusion: The challenge of sporulation of Bacillus coagulans BVB5 was overcome, a fact that can be verified with the results of fermentation kinetic which presented sporulation degree more than 99%

Effect of vegetable by-products on folate production by starter and probiotic microorganisms to develop a bio-enriched fermented soy product / Efeito de subprodutos vegetais na produção de folatos por microrganismos starter e probióticos para o desenvolvimento de um produto de soja fermentado bioenriquecido

However, folate production was strain-dependent and also dependent on the environmental conditions and on the vegetable substrate used. Passion fruit by-product presented the lowest folate concentration and was selected for the following experiments. Thus, the impact of the supplementation of soymilk with passion fruit by-product and/or commercial prebiotic fructooligosaccharides FOS P95 on the folate production by three St. thermophilus strains, as well as four probiotic Lactobacillus strains (LA-5, LGG, PCC, and RC-14) were evaluated. St. thermophilus ST-M6 and TH-4 produced the highest amounts of folate in all fermented soymilks. The concentration of the vitamin was also high when these strains grew in co-culture with LA-5 and LGG. Soymilk supplemented with both passion fruit by-product and FOS together presented the highest concentration of folate when fermented by the co-culture TH-4+LGG. This co-culture was selected to produce four fermented soy products (FSP). All FSP were bio-enriched with folate produced by the co-culture and the probiotic strain LGG remained always above 8 log CFU/mL until the end of the storage period (28 days at 4ºC). In contrast, the concentration of the vitamin was stable until day 14 then a slight decrease was observed at the end of the storage period. The FSP supplemented with both passion fruit by-product and FOS together may contribute with around 14% of the recommended daily intake for folate if consumed until day 14 of storage. During the in vitro simulated gastrointestinal conditions, the folate content of the digested FSP increased from 1.3 to 3.6-fold, especially at the small and large intestinal in vitro phases and the strain LGG was recovered. In contrast, St. thermophilus TH-4 was not recovered during the assay. Finally, the prebiotic potential of the bioactive compounds present in the fruit by-products was characterized. Fruit by-product water extracts (FWE) containing soluble fibres from fruit by-products were obtained through a hot-water extraction and were associated to phenolic compounds and showed antioxidant activity. The FWE (especially, orange and mango water extracts) presented an anti-inflammatory potential by decreasing the nitric oxide concentration produced in vitro by macrophages stimulated with lipopolisaccharides (LPS) from Salmonella Thyphymurium. The FWE (especially from mango) were able to stimulate the growth of the strains TH-4 and LGG, as well the folate production by these microorganisms when tested individually and in co-culture. The FWE also increased the adhesion of TH-4 and LGG to Caco-2 cells in an in vitro model. These results suggest a prebiotic potential of the fruit by-products evaluated and their potential towards increased folate production by the selected microorganisms. Therefore, the bio-enrichment of fermented soy products with folate produced by beneficial microorganisms is an alternative for the development of functional foods with high folate content. Additionally, fermentable bioactive compounds with functional and/or biological activity, such as soluble fibres associated to phenolic compounds with antioxidant activity, present in the fruit by-products, may act as potential prebiotic ingredients. These bioactive molecules may represent a potential natural alternative to synthetic drugs for the treatment of inflammatory processes

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de subprodutos vegetais, incluindo subprodutos do processamento de fruta (maracujá, laranja, acerola e manga) e de soja (okara) na produção de folatos de novo por microrganismos strater e probióticos para bioenriquecer um produto de soja fermentado. Na primeira etapa deste trabalho, o impacto da farinha de amaranto na produção de folatos pelos microrganismos também foi avaliado. Neste sentido, primeiramente, verificou-se o efeito desses subprodutos vegetais e da farinha de amaranto na capacidade de três cepas starter - Streptococcus thermophilus (ST-M6, TH-4 e TA-40) e 10 cepas probióticas (Lactobacillus (Lb.) acidophilus LA-5, Lb. fermentum PCC, Lb. reuteri RC-14, Lb. paracasei subsp. paracasei Lb. casei 431, Lb. paracasei subsp. paracasei F19, Lb. rhamnosus GR-1, and Lb. rhamnosus LGG, Bifidobacterium (B.) animalis subsp. lactis BB-12, B. longum subsp. longum BB-46, e B. longum subsp. infantis BB-02) em produzir folato utilizando um caldo MRS modificado. A maior parte dos microrganismos testados foi capaz de produzir folato. Entretanto, a produção foi considerada cepa-dependente e, também, dependente das condições ambientais e do tipo de subproduto vegetal empregado. O subproduto de maracujá apresentou a menor concentração de folato e, por isso, foi selecionado para os testes seguintes. Neste sentido, o impacto da suplementação do leite de soja com subproduto de maracujá e/ou com o prebiótico comercial fruto-oligosacarídeo FOS P95 na produção de folato pelas três cepas de St. thermophilus, bem como quarto cepas probióticas do gênero Lactobacillus (LA-5, LGG, PCC e RC-14), também foi avaliado. Em cultura pura, as cepas de St. thermophilus ST-M6 e TH-4 produziram grande quantidade de folato nas formulações de extrato de soja fermentados. A concentração da vitamina foi maior quando tais cepas se desenvolveram em co-cultura com LA-5 e LGG. Observou-se que o extrato de soja suplementado concomitantemente com subproduto de maracujá e FOS apresentou a maior quantidade de folato quando fermentado pela co-cultura TH-4+LGG. Esta co-cultura, portanto, foi selecionada para desenvolver os produtos fermentados de soja (PFS). Todas as formulações foram bioenriquecidas e a cepa LGG manteve-se viável por todo o período de armazenamento (28 dias a 4ºC). Entretanto, a concentração da vitamina manteve-se estável apenas até o dia 14, observando-se uma diminuição da quantidade de folato ao final do período de armazenamento. Constatou-se que o produto fermentado de soja suplementado concomitantemente com subproduto de maracujá e FOS pode contribuir com cerca de 14% da ingestão diária recomendada para folato se consumido até o dia 14 do armazenamento. Além disso, durante a simulação gastrointestinal in vitro, observou-se que a digestão aumentou de 1,3 a 3,6 vezes a concentração da vitamina incrementando, consideravelmente, a bioacessibilidade do folato, principalmente nas porções simuladas do intestino delgado e grosso do intestino e a cepa LGG foi recuperada. Entretanto, a cepa St. thermophilus TH-4 não foi recuperada durante o ensaio. Por fim, o potencial prebiótico de componentes bioativos presentes nos subprodutos de fruta foi caracterizado. Uma extração Hot Water foi conduzida, a fim de obter extratos aquosos de subprodutos de fruta ricos em fibras solúveis associadas a compostos fenólicos com atividade antioxidante. Observou-se, ainda, que tais extratos aquosos de subprodutos de fruta (laranja e manga) apresentaram potencial anti-inflamatório constatado pela diminuição da concentração de óxido nítrico produzido por macrófagos estimulados com lipopolissacarideo (LPS) de Salmonella Typhymurium in vitro. Além disso, os extratos aquosos de subprodutos de fruta (principalmente o extrato aquoso de subproduto de manga) foram capazes de estimular a multiplicação das cepas TH-4 e LGG, bem como a produção de folatos por estes microrganismos quando avaliados individualmente e em co-cultura. Adicionalmente, esses extratos aquosos de subprodutos de fruta aumentaram a adesao do TH-4 e do LGG a células Caco-2 em modelo in vitro. Neste sentido, os resultados sugerem um potencial prebiótico dos subprodutos de fruta testados, de modo a estimular, não somente o desenvolvimento dos microrganismos avaliados mas, principalmente, o potencial destes em produzir folatos na presença dos substratos vegetais testados. O bioenriquecimento dos produtos fermentados de soja com folatos produzidos por microrganismos benéficos emerge como alternativa de alimento potencialmente funcional com alto teor de folato. Adicionalmente, compostos bioativos fermentescíveis e com atividade biológica como, por exemplo, as fibras solúveis associadas a compostos fenólicos com atividade antioxidante, presentes nos subprodutos de fruta testados podem constituir potenciais ingredientes prebióticos, além de representarem uma possível alternativa natural para o tratamento de processos inflamatórios

Preclinical evaluation of nephroprotective potential of a probiotic formulation LOBUN on Cyclosporine-A induced renal dysfunction in Wistar rats

ABSTRACT The aim of present study was to evaluate the nephroprotective effect of probiotic formulation LOBUN on Cyclosporine A (CsA) induced renal dysfunction in Wistar rats. CsA (20 mg/kg body weight s.c) was administered for 15 days to cause renal dysfunction in Wistar rats. The probiotic formulation LOBUN was administered with the dose of 500 mg/kg body weight (p.o) for twice (TGI) and thrice a day (TGII). The samples were analyzed for the parameters like blood urine nitrogen (BUN), serum creatinine, serum uric acid, total serum protein and urine proteins, urine potassium, urine sodium. The renal functional and histopathological studies revealed that the oral administration of probiotic formulation LOBUN has provided appreciable renoprotection and possibly alleviated the symptoms of Chronic Kidney Disease (CKD) at the dose of 500 mg/kg body weight administered thrice a day and also the results were supported by histopathological findings.

Synbiotic aerated dessert: diet product development and evaluation of the intake effects in individuals with metabolic syndrome / Sobremesa aerada simbiótica: desenvolvimento do produto diet e avaliação dos efeitos da ingestão sobre indivíduos com síndrome metabólica

The objective of this work was to adapt a synbiotic aerated diet dessert, produced with the addition of a probiotic culture of Lactobacillus acidophilus La-5 and prebiotic ingredients (fructooligosaccharides and inulin), from the previously developed sucrose-containing formulation, and to evaluate the effects of its ingestion on adult volunteers with metabolic syndrome (MetS) during a period of 8 weeks of intervention. In addition, to improve the resistance of the probiotic to simulated gastrointestinal conditions, a microencapsulation process was optimized. For the development of the product, the formulations were produced in triplicates, in which probiotic culture survival, instrumental texture and sensory acceptability were evaluated up to 112 days of storage under freezing (-18 °C). Subsequently, a randomized, double-blind, placebo-controlled trial was carried out in which the product developed was administered to forty-five volunteers with MetS assigned into two groups, each receiving 40 g/day of: synbiotic diet mousse (SDM) (n=23) and placebo diet mousse (PDM) without pro- and prebiotics (n=22). Fasting blood samples were collected at the beginning and after 8 weeks of daily consumption of both mousses to determine the anthropometric, biochemical, haematological, inflammatory, and immunological parameters. Afterward, with the goal of improving the survival of L. acidophilus La-5 to in vitro simulated gastrointestinal conditions, the microencapsulation process conditions of the probiotic strain via spray drying were optimized using inulin as the encapsulating agent. The viability of L. acidophilus La-5 incorporated into SDM was above 7.8 log CFU/g and remained stable throughout storage. PDM showed lower acceptability (5.77-6.50) after storage than SDM (6.67-7.03). The texture was the most appreciated attribute and hardness of the SDM increased during storage, but remained stable for PDM. The clinical trial revealed significant reductions of total cholesterol and HDL-cholesterol, as well as of immunoglobulins (A and M), and interleukin-1ß in both groups during the intervention period. However, regarding intergroup changes, there were not any significant differences for all parameters evaluated (p>0.05). After the optimization of the microencapsulation process of the probiotic culture (80 mL/min, 82% and 10%, respectively for feed flow, aspiration rate, and inulin concentration), the microencapsulated probiotic strain incorporated in the SDM mousse showed the highest in vitro gastrointestinal survival (p<0.05) in the different stages of the assay, as follows: after the gastric phase: 5.68 log CFU/g (83.3%), the enteral phase I: 5.61 log CFU/g (82.3%), the enteral phase II: 5.56 log CFU/g (81.4%). Therefore, these results suggest that the presence of probiotic and prebiotics in SDM did not provide an additional effect on the health of volunteers with MetS. Additionally, the results confirm the appropriateness of the spray drying process to microencapsulate L. acidophilus La-5 using inulin as coating agent, providing increased resistance to the microencapsulated probiotic strain under in vitro gastrointestinal stress

O objetivo deste trabalho foi adaptar uma sobremesa aerada simbiótica diet do tipo musse, processada com a adição de uma cultura probiótica de Lactobacillus acidophilus La-5 e de ingredientes prebióticos (fruto-oligossacarídeos e inulina), a partir da formulação contendo sacarose desenvolvida anteriormente, e avaliar os efeitos de sua ingestão em voluntários adultos com síndrome metabólica (MetS) durante um período de 8 semanas de intervenção. Adicionalmente, para melhorar a resistência do probiótico frente às condições gastrintestinais simuladas, otimizou-se um processo de microencapsulação da cepa probiótica. Para o desenvolvimento do produto, as formulações foram produzidas em triplicata, em que se avaliou a sobrevivência da cultura probiótica, a textura instrumental e a aceitabilidade sensorial até 112 dias de armazenamento sob congelamento (-18 oC). Em seguida, foi realizado um estudo randomizado, duplo-cego e controlado por placebo, no qual o produto desenvolvido foi administrado a quarenta e cinco indivíduos com MetS divididos em dois grupos, cada um recebendo 40 g/dia de: mousse simbiótica diet (SDM) (n=23) e musse placebo diet (PDM) sem componentes pro- e prebióticos (n=22). As amostras sanguíneas foram coletadas em jejum no início e após 8 semanas de consumo diário de ambas as musses para a determinação dos parâmetros antropométricos, bioquímicos, hematológicos, inflamatórios e imunológicos. Posteriormente, com o intuito de melhorar a sobrevivência do L. acidophilus La-5 em condições gastrointestinais simuladas in vitro, as condições de processo de microencapsulação da cepa probiótica via spray drying foram otimizadas, utilizando inulina como agente encapsulante. A viabilidade de L. acidophilus La-5 incorporados na SDM foi superior a 7,8 log UFC/g e se manteve estável ao longo do armazenamento. A PDM mostrou menor aceitabilidade (5.77-6.50) após o armazenamento do que a SDM (6.67-7.03). A textura foi o atributo mais apreciado, sendo que a dureza da SDM apresentou elevação, enquanto a da PDM manteve-se estável. O ensaio clínico revelou reduções significativas de colesterol total, colesterol-HDL, imunoglobulinas (A e M) e interleucina1ß em ambos os grupos durante o período de intervenção. Entretanto, no que se refere às mudanças intergrupos, não se observou diferenças significativas para todos os parâmetros avaliados (p>0,05). Após a otimização do processo de microencapsulação da cultura probiótica (80 mL/min, 82% e 10%, respectivamente para o fluxo de alimentação, taxa de aspiração e concentração de inulina), a cepa probiótica microencapsulada incorporada a amostra SDM apresentou a maior sobrevivência gastrointestinal in vitro (p<0,05) nas diferentes etapas do ensaio, a saber: após a fase gástrica: 5,68 log UFC/g (83,3%); fase entérica I: 5,61 log UFC/g (82,3%); fase entérica II: 5,56 log UFC/g (81,4%). Portanto, esses resultados sugerem que a presença de probiótico e prebiótico na SDM não apresentou efeitos adicionais na saúde dos voluntários com MetS. Adicionalmente, os resultados confirmaram a adequação do processo de spray drying para a microencapsulação de L. acidophilus La-5 utilizando inulina como agente de revestimento, proporcionando uma maior resistência da cepa probiótica microencapsulada às condições gastrintestinais simuladas in vitro.

Análise morfométrica da parede intestinal e dinâmica de mucinas secretadas no jejuno de frangos suplementados com probiótico Bacillus subtilis cepa C3102 / Morphometric analysis of the intestinal wall and the dynamic of mucins secreted in the jejunum of broilers supplemented with Bacillus subtilis strain C3102

O objetivo deste estudo foi analisar a morfometria da parede intestinal e a dinâmica de mucinas secretadas no jejuno de frangos de corte suplementadas com probiótico Bacillus subtilis cepa C3102. Foram utilizados 720 pintinhos com um dia de vida, divididos em dois grupos: GA (Grupo controle) - aves alimentadas com ração sem suplementação de Bacillus subtilis cepa C3102 (1º ao 35º dia) e GB (Grupo tratado) - aves alimentadas com ração com suplementação de Bacillus subtilis cepa C3102 (1º ao 35º dia). Aos 7 e 35 dias 2cm do jejuno foram coletados e submetidos à rotina de processamento histológico. Cortes transversais de 1μm foram corados pela técnica do Alcian Blue (AB) para detecção de sialomucinas (pH 0,5) e sulfomucinas (pH 2,5), como também para contagem de células caliciformes presentes. A análise histoquímica revelou uma maior quantidade de sialomucinas presentes no jejuno dos animais que foram suplementados com probiótico Bacillus subtilis cepa C3102 (GB), quando comparados com os animais do grupo controle (GA). O número de células caliciformes presentes no grupo tratado (GB) foi superior ao grupo controle (GA).

The aim of this study was to analyze the morphology of the intestinal wall and the dynamics of mucins secreted in the jejunum of broilers supplemented with probiotic Bacillus subtilis strain C3102. We used 720 chicks with a day of life, divided into two groups: GA (control group) - birds fed diet without supplementation of Bacillus subtilis strain C3102 (1 to 35 days) and GB (treated group) - birds fed with supplementation of Bacillus subtilis strain C3102 (1 to 35 days). On the 7th and the 35th day, 2cm of jejunum were collected and submitted to histological processing. 1μm cross sections were stained by Alcian blue (AB) for detecting of sialomucins (pH 0.5) and sulphomucins (pH 2.5) as well as to count goblet cells. Histochemical analysis revealed a greater amount of sialomucins in the jejunum of animals that were supplemented with probiotic Bacillus subtilis strain C3102 (GB), when compared with the control group (GA). The number of goblet cells in the treated group (GB) was higher than the control group (GA).

Probióticos en pollos parrilleros: una estrategia para los modelos productivos intensivos / Probiotics in broilers´ rearing: a strategy for intensive production models

La industria avícola se ha convertido en una importante actividad económica en Argentina. En nuestro país, el consumo de carne aviar ha experimentado un aumento sustancial en los últimos años debido al incremento y a la diversificación de la oferta de productos. Gracias a los avances tecnológicos experimentados en los últimos años (mejoras genéticas, automatizaciones, planes sanitarios, etc.), el pollo parrillero alcanza en solo 50 días el peso requerido para la faena, con 2,7kg y una conversión alimentaria de alrededor de 1,6kg de alimento/kg de carne. Para satisfacer la demanda actual y continuar en la búsqueda de mercados internacionales, los pollos parrilleros son sometidos a sistemas de crianza intensivos en confinamiento. En esos sistemas, los pollos parrilleros están expuestos diariamente a diversos factores de estrés. La suplementación con antibióticos fue ampliamente utilizada en las últimas décadas para estabilizar la microbiota intestinal, mejorar los parámetros productivos y prevenir las enfermedades aviares. Sin embargo, la utilidad de esta estrategia ha sido cuestionada debido a la aparición y propagación de bacterias resistentes a los antibióticos en la carne. Por lo tanto, hay un renovado interés en la búsqueda de alternativas viables a los antibióticos; es así que la suplementación de las dietas con probióticos se plantea como una opción interesante. Esta revisión proporciona un resumen actual sobre el empleo de probióticos en pollos parrilleros, haciendo énfasis en el papel de estos como una terapia alternativa que podría reemplazar a los antibióticos utilizados en producción y sanidad animal

The broiler industry has become an important economic activity in Argentina. Global production of broiler meat has been growing in Argentina faster than for any other meats, possibly due to declining poultry prices and increasing incomes. Modern rearing systems can produce broilers ready to slaughter in 50 days, with the required 2.7kg of weight and a feed conversion of about 1.6kg feed/kg of meat. Nevertheless, broilers raised under these intensive conditions are exposed to various stressors every day. For many years, feed supplementation with antibiotics was widely used to stabilize the gut flora, improve general parameters and prevent avian diseases. However, the utility of antibiotics has been questioned because of the emergence and spread of antibiotic-resistant bacteria in meat. Therefore, there is a renewed interest in finding viable alternatives to antibiotics. One potential method is the supplementation of broiler diets with probiotics. This review provides an updated summary of the use of probiotics to improve sanitary conditions and enhance performance in broilers, demonstrating the role of probiotics as a reliable option to replace antimicrobial growth promoters

Estabilidade de micro-organismos potencialmente probióticos em barra de cereais - efeito da técnica de incorporação / Stability of microorganisms potentially probiotics in cereal bar - Effect of technique of incorporation

Este trabalho objetivou desenvolver formulações de barras de cereais contendo Lactobacillus acidophilus e Saccharomyces boulardii e avaliar a estabilidade destes micro-organismos potencialmente probióticos no produto elaborado durante o tempo de armazenamento (shelf life). Foram formuladas barras de cereais contendo separadamente os agentes probióticos S. boulardii e L. acidophilus, ambos nas formas liofilizada, granulados com lactose e encapsulados em alginato de cálcio. Foi avaliada a estabilidade dos micro-organismos durante o tempo de armazenamento. Tanto a levedura S. boulardii quanto a bactéria L. acidophilus apresentaram maior sobrevida na forma liofilizada, quando comparado com as outras formas de incorporação, mantendo contagem na faixa de 7 log UFC/g, durante oito semanas e na faixa de 7 log UFC/g, durante seis semanas, respectivamente. Comparando os resultados da incorporação dos dois micro-organismos na forma livre liofilizada observouse que a população de S. boulardii apresentou melhores resultados de viabilidade quando comparada com a população de L. acidophilus. Este estudo mostrou que é possível incorporar micro-organismos potencialmente probióticos em barras de cereais, preferencialmente na forma liofilizada, por proporcionar maior sobrevida dos micro-organismos.(AU)

This study aims to develop formulations of cereal bars that contain Lactobacillus acidophilus and Saccharomyces boulardii and evaluate the stability of these potentially probiotic microorganisms in the elaborated product during the time of storage (shelf life). Cereal bars were designed containing separately the probiotic agents S. boulardii and L. acidophilus, both in the lyophilized form, granulated with lactose form and encapsulated in calcium alginate form. The stability of microorganisms during storage time was evaluated. Both, the yeast S. boulardii as well as the bacterium L. acidophilus showed a higher survival in the lyophilized form when compared with the other forms of incorporation, keeping the count in the range of 7 log UFC/g for eight weeks and in the range 7 log UFC/g for six weeks, respectively. Comparing the results of the incorporation of the two microorganisms in the free lyophilized form, one could observe that the population of S. boulardii showed better results of viability when compared with the population of L. acidophilus. This study showed that it is possible to incorporate potentially probiotic microorganisms in cereal bars, preferably in the lyophilized form, in order to provide a higher survival of the microorganisms.(AU)

Efeito de prebióticos e probióticos na microbiota intestinal e nas alterações metabólicas de indivíduos obesos / Effect of prebiotics and probiotics on the gut microbiota and metabolic changes in obese individuals

Currently, the growing prevalence of obesity and its comorbidities is a major public health problem. The intestine is a complex organ that has been increasingly studied in obesity because of its ability to signal pathways involved in the pathophysiology of this disease. OBJECTIVES: This review aimed to clarify the main effects of probiotics and prebiotics on the intestinal microbiota and metabolic abnormalities of obese subjects. Data source: The survey of articles was conducted at PubMed database using the following keywords: 'obesity', 'gut microbiota', 'probiotic' and 'prebiotic' involving scientific works published between 2009 and 2014. Data synthesis: We found that the intestinal microbiota can be modulated by diet, and it acts on the control of food intake by interacting with receptors and enzymes that interfere in the metabolic changes arising from obesity and in the modulation of the inflammatory response. Animal research has shown positive results with the use of prebiotics and probiotics as adjuncts in the treatment of obesity; however, results with humans still present controversial data. CONCLUSIONS: Evidence of the relationship between diet, microbiota and immune system shows that a better understanding of the role of microbiota in obesity leads to new perspectives in the development of therapies for this disease

A crescente prevalência da obesidade e suas comorbidades tem sido um dos principais problemas de saúde pública atualmente. O intestino é um órgão complexo, cada vez mais estudado na obesidade pela sua capacidade de sinalizar vias metabólicas envolvidas na fisiopatologia dessa doença. OBJETIVO: Esclarecer os principais efeitos de probióticos e prebióticos nas alterações metabólicas e da microbiota intestinal de indivíduos obesos. Fonte de dados: O levantamento dos artigos foi realizado na base de dados Pubmed, utilizando os descritores: obesity, gut microbiota, probiotic e prebiotic envolvendo publicações no período de 2009 a 2014. Síntese dos dados: Constatou-se que a microbiota intestinal pode ser modulada pela dieta e atuar no controle da ingestão alimentar interagindo com receptores e enzimas que interferem nas alterações metabólicas decorrentes da obesidade e na modulação da resposta inflamatória. Pesquisas com animais mostraram resultados positivos do uso de prebióticos e probióticos como coadjuvantes no tratamento da obesidade, contudo, os resultados com humanos ainda apresentam dados controversos. CONCLUSÕES: Evidências da relação entre dieta, microbiota e sistema imune demonstram que a melhor compreensão do papel da microbiota na obesidade leva a novas perspectivas no desenvolvimento de terapias para a obesidade

Propriedades probióticas in vitro de Lactobacillus spp. isolados de queijos minas artesanais da Serra da Canastra - MG / In vitro probiotic properties of Lactobacillus spp. isolated from Minas artisanal cheese from Serra da Canastra - MG

O objetivo deste estudo foi determinar o potencial probiótico in vitro de Lactobacillus spp. isolados de queijos minas artesanais da Serra da Canastra, considerando-se o antagonismo entre amostras isoladas frente a microrganismos indicadores, a susceptibilidade a antimicrobianos, a sensibilidade ao ácido gástrico e a sensibilidade a sais biliares. Todas as bactérias ácido-lácticas testadas apresentaram resistência ao ácido gástrico (pH 2,0) e aos sais biliares (0,3%), bem como atividade antagonista contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Salmonella enterica var. Typhimurium, Enterococcus faecalis e bactérias ácido-lácticas isoladas dos próprios queijos - Lactobacillus plantarum (D27) e Lactobacillus rhamnosus (B25). Todas as amostras foram sensíveis à eritromicina e tetraciclina e resistentes à ciprofloxacina, gentamicina, oxacilina, estreptomicina e vancomicina. L. plantarum (B17) apresentou melhor potencial probiótico, pois obteve resultados satisfatórios em todas as propriedades avaliadas. Mais estudos são necessários para verificar a presença e a capacidade de transmissão de genes de resistência antimicrobiana a outros microrganismos e para avaliar o potencial dos microrganismos in vivo. As bactérias selecionadas poderão ser utilizadas na elaboração de queijos em que sejam mantidos o sabor e a tradição do queijo minas artesanal do estado de Minas Gerais...

The aim of this study was to determine some in vitro probiotic features of Lactobacillus spp. isolated from Minas artisanal cheese from Serra da Canastra in order to select some bacteria for future production of safer cheeses keeping their natural flavor and tradition. The evaluated properties were antagonism against indicator microorganisms, antimicrobial susceptibility and also sensitivity to gastric acid and to bile salts. All lactic acid bacteria tested were resistant to gastric acid (pH 2.0) and bile salts (0.3%). Antagonistic activities were detected against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Salmonella entericavar. Typhimurium, Enterococcus faecalis and other lactic bacteria isolated from the same cheese - Lactobacillus plantarum (D27) and Lactobacillus rhamnosus (B25). All samples were sensitive to the antimicrobials erythromycin, tetracycline and resistant to ciprofloxacin, gentamycin, oxacillin, streptomycin and vancomycin. L.plantarum (B17) presented the best probiotic potential. Further studies are needed to verify the presence and the capacity of transmission of antimicrobial resistance genes to other microorganisms and evaluate the in vivo probiotic potential of the selected microorganisms...

Probiotic technological and functional characteristics of Lactobacillus strains isolated from chicken gut / Características tecnológicas e funcionais de linhagens de Lactobacillus isoladas do trato gastrointestinal de frangos

Lactobacillus spp. isolated from different portions of chickens' gastrointestinal tract were evaluated concerning their ability to survive in a water-in-oil (W/0) emulsion containing sesame and sunflower oil. After sixty days of emulsion storage under refrigeration, three of five strains tested survived in number equal to or higher than 10(6)cfu/g. Lactobacillus reuteri 2M14C, which presented the highest survival in W/O emulsion (10(7)cfu/g), was tested for its capacity to resist throughout the passage through gnotobiotic mice gastrointestinal tract and for the ability to stimulate murine peritoneal macrophages phagocytosis. This strain remained at a number above 10(9)cfu/g feces during ten days of monoassociation, and monoassociated mice showed phagocytic activity significantly greater than the germ-free controls (P<0.05). The results suggest that the formulation can be used to incorporate viable Lactobacillus spp. cells in animal feed. Moreover, the results suggest that L. reuteri 2M14C is a strong candidate to be incorporated in probiotic formulations for use in chicken.

Lactobacillus spp. isolados de diferentes porções do trato gastrintestinal de frangos foram testados quanto à capacidade de se manterem viáveis em uma emulsão água/óleo (A/O) contendo óleos de gergelim e de girassol. Após sessenta dias de estocagem sob refrigeração, três de cinco linhagens testadas sobreviveram em concentração igual ou superior a 10 6 UFC/g. Lactobacillus reuteri 2M14C, que apresentou maior capacidade de sobrevivência na emulsão desenvolvida (10 7 UFC/g), foi testado quanto à sua capacidade de sobreviver às condições do trato gastrintestinal in vivo em camundongos gnotobióticos. Após dez dias de monoassociação com L. reuteri 2M14C, foi testada também a capacidade de estimulação da atividade fagocítica de macrófagos peritoneais. A linhagem permaneceu em número superior a 10 9 UFC/g de conteúdo fecal durante os dez dias de monoassociação, e os camundongos monoassociados apresentaram atividade fagocítica maior (P<0,05) que a do grupo controle isento de germe. Os resultados sugerem que a formulação proposta é capaz de manter a viabilidade de células de lactobacilos para adição em ração animal, necessitando, no entanto, de um acompanhamento dessa viabilidade por tempo maior de estocagem. Além disso, os resultados demonstram que Lactobacillus reuteri 2M14C é um forte candidato a ser adicionado em formulações probióticas para uso em frangos.

In vitro probiotic potential of Lactobacillus spp. isolated from fermented milks / Potencial probiótico in vitro de Lactobacillus spp. isolados de leites fermentados

The potential of in vitro probiotic Lactobacillus spp. was evaluated in fermented milks marketed in Belo Horizonte, MG, Brazil. Of the samples analyzed, 86.7% had at least 10(6) CFU/mL of Lactobacillus spp., complying with the Brazilian quality standards for fermented milks. Furthermore, 56.7% had minimum count ranging from 10(8) to 10(9) CFU/mL, which is in accordance with legal parameters. The remaining 43.3% would not be able to satisfactorily guarantee benefits to consumers. The amount of Lactobacillus spp. varied between batches of products, which may indicate failures in monitoring during manufacture, transport or storage. All strains of Lactobacillus spp. showed some inhibitory activity against the indicator microorganisms, being more pronounced against pathogenic microorganisms than against non-pathogenic (P<0.05). Samples of Lactobacillus spp. showed different profiles of antimicrobial susceptibility, with an occurrence of cases of multidrug resistance. All strains tested showed sensitivity to bile salts (0.3%) and resistance to gastric pH (2.0). Lactobacillus spp. of commercial fermented milks should be present in higher amounts in some brands, be resistant to bile salts and have no multiple resistance to antimicrobials.

O potencial probiótico in vitro de Lactobacillus spp. foi avaliado em leites fermentados comercializados em Belo Horizonte, MG, Brasil. Das amostras analisadas, 86,7% apresentaram quantidade mínima de 106UFC/mL de Lactobacillus spp., enquadrando-se no padrão brasileiro de qualidade de leites fermentados. Além disso, 56,7% apresentaram quantidade mínima de 108a 109UFC/mL, estando em conformidade com os parâmetros legais vigentes. As demais 43,3% não estariam aptas a garantir satisfatoriamente efeitos benéficos aos consumidores. Observou-se variação na quantidade de Lactobacillus spp. entre lotes dos produtos, o que pode indicar falhas no monitoramento durante a fabricação, transporte ou estocagem destes. Todas as amostras de Lactobacillus spp. demonstraram alguma atividade inibitória frente aos microrganismos indicadores, sendo mais intensa contra microrganismos patogênicos que não patogênicos (P<0,05). As amostras de Lactobacillus spp. apresentaram diferentes perfis de susceptibilidade aos antimicrobianos, ocorrendo casos de multirresistência. Todas as amostras testadas apresentaram sensibilidade in vitro a sais biliares (0,3%) e resistência in vitro ao pH gástrico (2,0). Lactobacillus spp. dos leites fermentados testados deveriam estar presentes em quantidades mais elevadas em algumas marcas comerciais, possuir resistência aos sais biliares e não apresentar resistência múltipla aos antimicrobianos.

Avaliação de probiótico na alimentação de poedeiras comerciais no segundo ciclo de postura / Evaluation of probiotics in feed for laying hens in the second cycle stance

Avaliou-se o efeito da inclusão de probiótico sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de poedeiras semipesadas no segundo ciclo de postura. Foram utilizadas 450 aves com 69 semanas de idade, distribuídas aleatoriamente em um delineamento inteiramente ao acaso, em cinco tratamentos, seis repetições e 15 aves por unidade experimental. A ração experimental foi à base de milho e farelo de soja e suplementada com probiótico composto por Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium e Bifidobacterium bifidum. O experimento teve a duração de 16 semanas e foi dividido em quatro períodos de 28 dias cada, nos quais as aves receberam cinco rações experimentais contendo diferentes porcentagens de inclusão de probiótico, 0; 0,05; 0,10; 0,15 e 0,20%. Não foi observado efeito (P>0,05) da inclusão de probiótico sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de galinhas poedeiras no segundo ciclo de postura. A inclusão de 0,10% de probiótico influenciou negativamente a gravidade específica dos ovos. A utilização de probiótico para galinhas no segundo ciclo de postura não interfere na produção e na qualidade dos ovos.

Evaluating the effect of the inclusion of probiotic on the performance and egg quality of laying hens in the second laying cycle, 450 birds were used at 69 weeks of age, distributed in a completely randomized design, in five treatments, six replicates and 15 poultries per experimental unit. The experimental diets were based on corn and soybean meal and supplemented with increasing levels of probiotic consisting of Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium, and Bifidobacterium bifidum. The experiment lasted 16 weeks, divided into four periods of 28 days each, in which the birds were fed five experimental diets containing different percentages of probiotic inclusion, 0; 0.05; 0.10; 0.15 and 0.20%, in the period from 69 to 85 weeks of age. There was no effect (P> 0.05) of the inclusion of probiotic on performance and egg quality of laying hens in the second laying cycle. The inclusion of 0.10% of probiotic negatively influenced the specific gravity of eggs. The probiotic used for laying hens in the second cycle does not interfere in production and egg quality.

Antagonistic activity of Lactobacillus acidophilus LA10 against Salmonella enterica serovar Enteritidis SE86 in mice

Salmonella enterica serovar Enteritidis is one of the main pathogens responsible for foodborne illness in Brazil. Probiotic bacteria can play a role in defense and recovery from enteropathogenic -infections. In this study, the ability of Lactobacillus acidophilus LA10 to colonise and exert anta-gonistic effects in the gastrointestinal tract was tested before and during experimental infection in conventional mice contaminated with S. Enteritidis (SE86). A dose of 0.1 mL containing 10(8) viable cells of SE86 and L. acidophilus LA10 was orally administered by gavage to mice. The experiment was divided into groups. As a negative control, Group 1 was administered only sterile saline solution. As a positive control, Group 2 was administered only SE86. Group 3 was first administered SE86, and after 10 days, treated with L. acidophilus LA10. Group 4 was first administered L. acidophilus LA10,and after 10 days, challenged with SE86.The results demonstrated that a significant number of SE86 cells were able to colonize the gastrointestinal tract of mice, specifically in the colon and ileum. L. acidophilus LA10 demonstrated an antagonistic effect against SE86, with better results observed for Group 3 over Group 4. Thus, L. acidophilus LA10 shows potential antagonistic effects against S. Enteritidis SE86, especially if administered after infection.